俗話說，巧婦難為無米之炊。再精妙的技術(shù)，缺乏“原材料”也舉步維艱。在生物制藥領(lǐng)域，難表達(dá)蛋白就是這樣一個(gè)“天生反骨的存在”，由于它的產(chǎn)量低，很多獨(dú)具潛力的分子止步于早研階段。漢騰生物開發(fā)了針對難表達(dá)蛋白（Difficult to express protein）的DTEasy工具箱，全面解決難表達(dá)蛋白的痛點(diǎn)，助力生物制藥產(chǎn)業(yè)突破瓶頸，氣決泉達(dá)。
在生物制藥領(lǐng)域，表達(dá)和生產(chǎn)一些難表達(dá)的蛋白質(zhì)，如部分單克隆抗體、細(xì)胞因子、血液因子、酶、膜蛋白以及復(fù)雜結(jié)構(gòu)改造抗體等，一直是個(gè)巨大的挑戰(zhàn)。
難表達(dá)蛋白產(chǎn)量低的原因
1、難折疊、結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定或高疏水性
對于以下幾種類型：
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分子量過大、富含二硫鍵的蛋白復(fù)合物
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需要復(fù)雜糖基化修飾的蛋白
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膜蛋白、金屬蛋白、部分細(xì)胞因子等疏水性較高或需要特定配體來穩(wěn)定其結(jié)構(gòu)的蛋白
常常難以正確折疊或保持穩(wěn)態(tài)結(jié)構(gòu)，容易在細(xì)胞內(nèi)形成聚集物，引發(fā)蛋白降解及細(xì)胞凋亡。
單抗中也有部分亞類產(chǎn)量較低（低于1g/L），主要由于抗體的重鏈和輕鏈的種系或互補(bǔ)決定區(qū)的序列問題，導(dǎo)致復(fù)合物不能有效組裝，形成錯(cuò)誤折疊或聚集。
2、細(xì)胞毒性
蛋白酶和凝血酶的毒性功能在過表達(dá)時(shí)引發(fā)細(xì)胞凋亡，導(dǎo)致難以重組表達(dá)。
由于難表達(dá)蛋白質(zhì)產(chǎn)量受限，很多獨(dú)具潛力的分子由于可開發(fā)性限制止步于早研階段，非?？上?！
為解決生物制藥產(chǎn)業(yè)長期以來的“沉疴宿疾”，漢騰生物開發(fā)了DTEasy難表達(dá)蛋白平臺(tái)，通過集成并優(yōu)化表達(dá)過程中的各個(gè)關(guān)鍵階段，成功提高難表達(dá)蛋白的產(chǎn)量。
漢騰生物 DTEasy工具箱
復(fù)合策略系統(tǒng)解決難表達(dá)蛋白的痛點(diǎn)
漢騰生物開發(fā)了針對難表達(dá)蛋白（Difficult to express protein）的DTEasy工具箱，通過分子改良、專有載體、優(yōu)選宿主細(xì)胞系以及定制化工藝，全面提升難表達(dá)蛋白產(chǎn)量。
1
分子改良：
改造序列，提升蛋白穩(wěn)定性
基于序列分析和蛋白結(jié)構(gòu)預(yù)測，通過引入突變或優(yōu)化氨基酸序列，改善蛋白的三維結(jié)構(gòu)，提高其熱穩(wěn)定性。
在項(xiàng)目中，我們通過序列風(fēng)險(xiǎn)分析和點(diǎn)突變，成功將細(xì)胞池產(chǎn)量提高到原來的7.6倍，且未引起活性改變。
▲來源：漢騰生物內(nèi)部研究數(shù)據(jù)
2
專有載體：
優(yōu)化載體，提高蛋白合成效率
通過轉(zhuǎn)錄組差異表達(dá)分析，將與難表達(dá)蛋白產(chǎn)量正相關(guān)的順式作用元件插入到載體中，對不同類型重組蛋白有100%-400%產(chǎn)量提升。
▲來源：漢騰生物內(nèi)部研究數(shù)據(jù)
3
最佳宿主細(xì)胞系選擇：
挑選適配宿主，實(shí)現(xiàn)高效表達(dá)
漢騰獨(dú)家GlycoExpress人類髓系來源細(xì)胞系，專門用于表達(dá)困難的糖蛋白。在GPCR類、血液因子、復(fù)雜多聚物等重組蛋白表達(dá)中，具有更高的產(chǎn)量和與人類天然蛋白更相似的糖譜。
▲來源：漢騰生物內(nèi)部研究數(shù)據(jù)
4
定制化工藝：
專有添加劑，最高實(shí)現(xiàn)產(chǎn)量3倍提升
對于培養(yǎng)過程中對細(xì)胞產(chǎn)生一定壓力的蛋白，通過添加劑增加細(xì)胞耐受也可以提升表達(dá)量。DTEasy專有添加劑可只需在培養(yǎng)過程中簡單的單次添加，即可最高提升3倍表達(dá)量。
▲來源：漢騰生物內(nèi)部研究數(shù)據(jù)
綜上，漢騰DTEasy平臺(tái)通過分子設(shè)計(jì)、載體優(yōu)化、優(yōu)選宿主細(xì)胞系以及定制工藝，多管齊下，解決不同類型蛋白的難表達(dá)問題?？蓭椭蛻翎尫鸥邇r(jià)值但傳統(tǒng)上難以表達(dá)的蛋白質(zhì)的生產(chǎn)潛力，加快開發(fā)進(jìn)度，提供設(shè)計(jì)選擇的靈活性，并最終擴(kuò)大患者獲得創(chuàng)新生物制品的機(jī)會(huì)。